• 产品名称: 大肠杆菌表达
  • 产品编号: JSFW21
  • 上架时间: 2016-06-08
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原核蛋白表达是将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌表达出大量目的蛋白。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下优点:易于生长和控制;易于培养,实验耗费少;可选择多种大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒。 
科佰生物可根据客户的需求,提供从质粒构建,基因表达,蛋白纯化等一系列服务。

服务特色: 
1、一站式解决方案,从基因合成到蛋白表达纯化。 
2、技术成熟稳定,方法手段齐全,经验丰富。 
3、完备的cDNA文库和载体库。

技术路线:

服务编号

服务步骤

具体内容

交付内容

价格

周期

SP001

目的基因获取

1.客户提供

2.基因合成

3.科佰cDNA模板

4.其他公司商业模板

含目的基因的载体质粒

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详询

SP002

目的基因亚克隆

1.将目的基因亚克隆到合适的表达载体上

2.测序验证

含目的基因的表达质粒,测序报告

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SP003

蛋白表达的小试

1.扩增并抽提构建好的表达质粒。
2.将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。
3.至少挑选3个阳性克隆于LB培养基中扩增并选择合适的条件,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,筛选出合适菌株。

重组质粒的表达菌株及表达检测报告

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SP004

蛋白表达的优化

对蛋白表达时间、温度、IPTG浓度等表达条件进行优化,选择优化条件下满足客户目标的菌株。

各方面参数较好的重组菌株

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SP005

扩大培养

根据前面优化的条件,扩大到1L摇瓶培养重组菌株。

各方面参数较好的重组菌株

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详询

SP006

蛋白表达分析和纯化

1.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
2.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
3.通过亲和层析,离子交换,疏水及凝胶过滤等方法纯化表达的重组蛋白。
4.利用蛋白酶去除不需要的纯化标签(可选,注:构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点),再纯化获得所需的目的蛋白。

1mg纯化好的目的蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签或去除纯化标签的目的蛋白,纯度最高可达95%以上。

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对于需要表达大量的蛋白的需求,请点击“大规模蛋白表达”。

服务说明:

1.客户自带的载体需提供详细的酶切图谱及相关信息;

2.由于某些基因表达产物会抑制宿主菌生长。因此,我们不保证所有的基因都能够高效表达;

3.客户请提供载体改造的具体要求,预进行改造的质粒(序列经测序验证正确)及其图谱和序列,能够获得所需元件或基因的模板(质粒或其它)及其相关图谱和序列;

4.对于载体改造和基因片段克隆,客户需要提供载体、PCR产物或酶切产物、以及载体来源及基因背景资料等。

订购方法:

 如需帮助,请发送邮件至sales@cobioer.com或拨打4008750250,科佰生物的技术支持将竭诚为您服务。

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