南京科佰生物科技有限公司官方网站欢迎您的光临!

免费咨询热线: 4008-750-250

搜索
确认
取消
/
/
/
一文教你学会如何选择示踪细胞

新闻中心

一文教你学会如何选择示踪细胞

  • 分类:公司动态
  • 作者:科佰生物
  • 来源:科佰生物
  • 发布时间:2023-11-16 14:10
  • 访问量:

【概要描述】在示踪细胞的构建方面,科佰生物有着多年丰富经验以及多株示踪细胞现货,进一步助力客户发表高分文献。以下是7篇高分文章精选,总计IF:71.6,其中最高 IF为15.1。

一文教你学会如何选择示踪细胞

【概要描述】在示踪细胞的构建方面,科佰生物有着多年丰富经验以及多株示踪细胞现货,进一步助力客户发表高分文献。以下是7篇高分文章精选,总计IF:71.6,其中最高 IF为15.1。

  • 分类:公司动态
  • 作者:科佰生物
  • 来源:科佰生物
  • 发布时间:2023-11-16 14:10
  • 访问量:
详情

动物模型实验是药物研发和生物医学研究不可或缺的手段,在新药试验、疾病诊断、药物与医疗器械安全性研究等领域被广泛使用,通过动物实验,可取得真实可靠的研究数据。

 

传统的动物模型实验方法存在一定局限性和不足,特别是需要大量的动物分组和在不同时间点解剖获取数据, 得到多个时间点的实验结果,存在工作量大和组间差异问题。相比之下,活体成像技术通过对同一组实验对象在不同时间点进行成像,跟踪同一观察目标(标记细胞和标记分子)的移动及变化,不存在常见的组间差异,工作量和实验动物消耗可大为减少,所得的数据也更加真实可信。此外, 活体成像技术不涉及放射性物质,具有操作简单,所得结果直观,灵敏度高等特点,可用于追踪靶细胞数量,体积变化和体内分布,从分子和细胞水平对药物疗效进行评估。

 

 

 

示踪细胞的构建与使用

 

 

 

活体成像技术的应用过程中,示踪细胞选择和标记非常关键,对于示踪细胞构建过程主要为以下几个步骤:

 

1. 选择符合实验需求和成瘤性指标的母细胞,需要采用来源正确,成瘤性良好,传代次数较低,状态保持良好的细胞株作为母细胞;

 

2. 选择适合的标记蛋白,常用的标记蛋白有Firefly Luciferase,GFP,EGFP, RFP, YFP等;

 

3. 选择标记蛋白表达载体和基因导入方式(常用慢病毒方式),筛选稳定细胞株;

 

4. 示踪细胞体外发光测试,测定发光信号强度和细胞传代信号稳定性,确保示踪细胞在体外和体内都能稳定高水平表达标记蛋白,以科佰生物A549-Luc细胞为例:

 

Figure 2. Detect Luciferase assay by Promega Bright-Glo Luciferase Assay System.The number of Luminescence signal is 524±9(Mean±SD) on A549 cells while 898951±21097(Mean±SD) on A549-Luc cells. 

 

 

Figure 3. Stablity test results. A549-Luc cells showed at least 32 passage stability with similar luminescence unit.

 

5. 根据实验需要通过尾静脉注射、皮下移植、原位移植等方法在动物体内接种已标记的示踪细胞。

 

6. 活体成像:动物经麻醉(气麻/针麻)后放入成像暗箱平台,开启照明灯(明场)拍摄背景图。关闭照明灯,在没有外界光源的条件下(暗场)拍摄由小鼠体内发出的特异性光子。明场与暗场的背景图叠加后可以直观的显示动物体内特异光子的部位和强度,完成成像操作。值得注意的是荧光成像需要选择合适的激发光和发射光滤光片,生物发光则需要成像前注射luciferase底物。

 

7. 数据处理:动物活体成像图像处理软件除了提供含有光子强度标尺的成像图片外,还能计算分析发光面积、总光子数、光子强度的相关参数供实验者参考。

 

 

 

科佰助力文献发表

 

 

 

在示踪细胞的构建方面,科佰生物有着多年丰富经验以及多株示踪细胞现货,进一步助力客户发表高分文献。以下是7篇高分文章精选,总计IF:71.6,其中最高 IF为15.1。

 

 

01 | Glioma261-Luc

 

 
 

 

文献标题Reversing T Cell Dysfunction to Boost Glioblastoma Immunotherapy by Paroxetine-Mediated GRK2 Inhibition and Blockade of Multiple Checkpoints through Biomimetic Nanoparticles

 

第一作者:Tingting Wang

单位:苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室

发表期刊:  Advanced Science  

影响因子:  15.1

发表日期:  2023-01-25

DOI: 10.1002/advs.202204961

 

文章主题

T细胞功能障碍诱导的肿瘤免疫逃逸在胶质母细胞瘤(GBM)中尤为严重,并显著影响免疫治疗的疗效。创新性地逆转T细胞功能障碍对改善GBM免疫治疗至关重要。在此,通过重新利用美国食品和药物管理局批准的抗抑郁药物帕罗西汀(PX)与仿生纳米颗粒(CS-J@CM/6 NPs),T细胞功能障碍被显著逆转,并促进了GBM的免疫治疗。PX成功应用于消除GBM小鼠骨髓中的T细胞隔离,并增加它们在肿瘤中的浸润。仿生NPs由超小的Cu2−xSeNPs、JQ1和CD6修饰的肿瘤细胞膜组成,通过CD6与活化的白细胞粘附分子的特异性相互作用有效地进入肿瘤。它们通过负载JQ1的双重作用改善T细胞功能障碍,同时降低T细胞和T细胞上PD-1的表达和PD-L1的表达。NP还能诱导肿瘤细胞的免疫原性细胞死亡,从而激活免疫反应。PX和仿生CS-J@CM/6 NPs的协同作用显著提高了GBM携带小鼠的存活率。这项工作通过重新利用晚期NPs的“旧药物”,为肿瘤免疫治疗提供了新的见解。

 

Cobioer合作产品:  Glioma261-Luc  货号:CBP30157L

 

 

 

02 | NCI-N87-Luc

 

 
 

 

文献标题Engineering Bifunctional Calcium Alendronate Gene-Delivery Nanoneedle for Synergistic Chemo/Immuno-Therapy Against HER2 Positive Ovarian Cancer.

 

第一作者:Guochuang Chen

单位:深圳新诺微环生物科技有限公司和广东中山大学附属第七医院精准医学研究中心

发表期刊:Advanced science

影响因子:  15.1

发表日期: 2023-03-18

DOI: 10.1002/advs.202204654

 

文章主题:卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤。大多数患者在晚期被诊断出,伴有广泛的腹膜扩散和腹水。双特异性T细胞衔接器(BiTEs)在血液恶性肿瘤中表现出了令人印象深刻的抗肿瘤疗效,但在实体肿瘤中的临床疗效受到限制,原因包括半衰期短、需要持续静脉输注以及相关治疗水平下的严重毒性。为了解决这些问题,本研究报道了一种基于阿仑膦酸钙(CaALN)的基因传递系统设计,用于表达治疗水平的BiTEHER2×CD3),以实现高效的卵巢癌免疫治疗。通过简单的绿色配位反应实现了CaALN纳米球和纳米针的可控构建,具有高长宽比的纳米针状阿仑膦酸(CaALN-N)在体内无系统毒性的情况下实现了高效的基因传递至腹膜。特别是,CaALN-N通过下调HER2信号通路诱导SKOV3-luc细胞凋亡,并与HER2×CD3协同作用产生高抗肿瘤反应。在体内给药CaALN-N/minicircle DNA编码HER2×CD3MC-HER2×CD3)可产生持续的治疗水平的BiTE,并抑制人类卵巢癌异种移植模型中的肿瘤生长。总的来说,工程阿仑膦酸钠钙纳米针是一种高效和协同治疗卵巢癌的双功能基因传递平台

 

Cobioer合作产品:   NCI-N87-Luc   货号:CBP30122L

 

 

 

 

 

 

 

03 | 4T1-Luc

 

 
 

 

文献标题Reducing PD-L1 expression with a self-assembled nanodrug: an alternative to PD-L1 antibody for enhanced chemo-immunotherapy

 

第一作者:Shuxian Cai

单位:福州大学食品安全与生物分析教育部重点实验室发表期刊:Theranostics

影响因子: 12.4

发表日期:
2021-01-01

DOI:10.7150/thno.45777

 

文章主题:免疫检查点、程序性细胞死亡配体 1(PD-L1) 和程序性细胞死亡1(PD-1) 之间的结合会损害 T 细胞介导的免疫监视。使用免疫检查点抑制剂(ICI)阻断癌细胞膜上的PD-L1或活化T细胞膜上的PD-1的免疫检查点治疗可以恢复T细胞的抗肿瘤功能。然而,PD-L1 的细胞内表达及其在癌细胞膜上的活性再分布可能会损害 ICI 的治疗益处。为了解决这个问题,我们开发了一种能够降低PD-L1表达和增强抗肿瘤作用的纳米药物(MS NPs)。该纳米药物由免疫佐剂二甲双胍(Met,一种老药)和抗癌剂7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)通过氢键和静电相互作用自组装而成。开展了一系列实验,包括MS NPs的表征、MS NPs介导的PD-L1表达下调和治疗效果的验证、MS NPs介导的化学免疫治疗和肿瘤转移抑制。与构象阻断癌细胞膜PD-L1的ICIs不同,MS NPs通过二甲双胍直接降低PD-L1水平,实现免疫治疗。因此,MS NPs显示出比同类产品更强的化学免疫治疗效果。MS NPs还通过重塑细胞外基质和恢复免疫监视来有效抑制肿瘤转移。此外,MS NPs治疗小鼠的主要器官未观察到明显毒性,MS NPs治疗后小鼠存活率高。我们通过免疫佐剂Met和抗癌剂SN38的自组装设计了纳米药物MS NPs,用于免疫治疗和化疗的联合治疗。MS NPs可能会打破免疫治疗中基于抗体的ICIs的僵局,而重新利用旧药可能为新型ICI的开发提供新的视角。

 

Cobioer合作产品:   4T1-Luc   货号:CBP30102L

 

 

 

 

04 | HepG2-Luc

 

 
 

 

文献标题:Modified ASO conjugates encapsulated with cytidinyl/cationic lipids exhibit more potent and longer-lasting anti-HCC effects

 

第一作者:Yufei Pan

单位:北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室

发表期刊: Molecular Therapy-Nucleic Acids

影响因子:  8.8

发表日期 :2023-05-04

DOI:10.1016/j.omtn.2023.04.028

 

文章主题:反义寡核苷酸(ASOs)是一类以mrna或基因为靶点的治疗方法。然而,在体内靶组织的有效传递和最佳积累仍然是一个具有挑战性的问题。CT102是一种靶向IGF1R mRNA并诱导细胞凋亡的ASO。本文对脂质体传递的ASOs的组织分布进行了详细的探索。基于DCP(胞苷基/阳离子脂质DNCA/CLD和DSPE-PEG)和寡核苷酸之间的多种分子间相互作用,包括氢键、p-p堆积和静电相互作用,确定了一种导致肝脏积累增加的配方。结构优化的ct102为肝癌的治疗提供了一种新的策略。gapmer CT102MOE5和偶联物Glu-CT102MOE5在体外100 nM时表现出良好的抗增殖和IGF1R mRNA抑制作用,在体内较低的剂量和给药频率下具有更高的疗效。结合转录组和蛋白质组分析显示,在ASO治疗中可能同时存在额外的相关靶点和功能调控。这些结果表明,脂质包封和结构优化结合在寡核苷酸药物的传递中具有良好的临床应用前景。

 

Cobioer合作产品:   HepG2-Luc   货号:CBP30043L

 

 

 

 

 

05 | A549-Luc

 

 
 

 

文献标题:Okicamelliaside targets the N-terminal chaperone pocket of HSP90 disrupts the chaperone protein interaction of HSP90-CDC37 and exerts antitumor activity

 

第一作者:Chuan-jing Cheng

单位:南开大学药物化学生物学全国重点实验室天津市分子药物研究重点实验室

发表期刊: Acta Pharmacologica Sinica

影响因子: 8.2

发表日期: 2021-07-29

DOl: 10.1038/s41401-021-00737-x

 

文章主题:热休克蛋白90(HSP90)已被公认为癌细胞的关键靶标。然而,靶向 HSP90 的 ATP 结合位点的各种毒性反应可能不是 HSP90 抑制剂的最佳选择。在本文中,发现了一种具有抗肿瘤作用的鞣花酸衍生物,即okicamelliside(OCS)。为了确定潜在的抗癌机制,将OCS光敏探针应用于靶点钓鱼和追踪。化学蛋白质组学和蛋白-药物相互作用实验表明,HSP90是OCS的关键靶点,具有很强的结合亲和力(K = 6.45 μM)。靶蛋白突变分析和分子动力学模拟表明,OCS可以竞争性作用于HSP47 N端伴侣口袋的关键Glu-90位点,其中共伴侣CDC37与HSP90结合,影响其稳定性并降低HSP90-CDC37的∆G。结果表明,OCS破坏了HSP90-CDC37的蛋白质-蛋白质相互作用;选择性影响 HSP90 下游激酶客户端蛋白,包括 CDK4、P-AKT 和 P-ERK1/2;并对A549细胞发挥抗肿瘤作用。此外,肿瘤异种移植实验以同样的方式证明了OCS的高抗肿瘤活性和低毒性。我们的研究结果发现了一种新型的 HSP90 N 末端伴侣口袋天然抑制剂,即OCS,它选择性地抑制 HSP90-CDC37 蛋白复合物的形成,并为 HSP90 抑制剂用于抗癌候选药物提供了进一步的见解。

 

Cobioer合作产品:  A549-Luc  号:CBP30021L

 

 

 

 

 

06 | U87/DK_Luc

 

 
 

 

文献标题:Blockade of the forward Na+ /Ca2+ exchanger suppresses the growth of glioblastoma cells through Ca2+‐mediated cell death

 

第一作者:Hui-Jie Hu

单位:上海交通大学医学院基础医学院药理学与化学生物学系

发表期刊:British Journal of 

Pharmacology

影响因子:  7.3

发表日期: 2019-06-17

DOI : 10.1111/bph.14692

 

文章主题:Na+/Ca2+交换器(NCX)以正向或反向模式工作,参与维持细胞内Ca2+([Ca2+]i)稳态,这对决定细胞命运至关重要。此前,许多针对反向或正向NCX的阻滞剂已经被开发和研究在缺血组织损伤中,但很少在胶质母细胞瘤中被检测到,用于抗肿瘤治疗。我们评估了NCX阻滞剂对胶质母细胞瘤生长的影响,以及NCX是否可以成为治疗的靶点。

NCX的低表达使胶质母细胞瘤细胞对[Ca2+]i的干扰敏感。旨在阻断正向NCX的干预措施可导致ca2+介导的胶质母细胞瘤损伤,从而具有治疗潜力。贝普利地尔可能是开发新的抗肿瘤药物的先导化合物。

 

Cobioer合作产品:  U87/DK-Luc  号:CBP30189L

 

 

 

 

07 | 4T1-Luc

 

 
 

 

文献标题:Saikosaponin A Inhibits Triple-Negative Breast Cancer Growth and Metastasis Through Downregulation of CXCR4 

 

第一作者:Ying Wang

单位:上海中医药大学药学院

发表期刊:Frontiers in oncology

影响因子: 4.7

发表日期:2020-01-28

DOI:10.3389/fonc.2019.01487

 

文章主题:由于缺乏公认的治疗分子靶点,与其他乳腺癌亚型不同,三阴性乳腺癌 (TNBC) 患者通常没有从靶向药物的进展中受益。CXCR4/SDF-1轴参与TNBC的肿瘤生长和转移。因此,下调癌细胞中CXCR4的表达是抑制原发肿瘤生长和TNBC转移的潜在治疗策略。为了鉴定中药中抑制CXCR4表达的生物活性化合物,我们研究了柴胡皂苷ASSA)对TNBC细胞中CXCR4表达和功能的影响能力。对细胞生长、迁移、侵袭和蛋白表达进行分析。还使用了小干扰RNAsiRNA)和非侵入性生物发光的敲低。SSA 减少了 SUM149 MDA-MB-231 细胞的增殖和集落形成。SSA抑制TNBC细胞的迁移和侵袭。对于小鼠,SSA抑制原发肿瘤生长并减少高度转移性三阴性4T1-luc细胞的肺转移。SSA 抑制CXCR4 表达,但不调控 CXCR7 表达,并且 .CXCR4表达下调逆转了对TNBC细胞迁移和侵袭的抑制作用。此外,SSA使Akt/mTOR信号通路失活,抑制MMP-9MMP-2表达。结果表明,SSA通过抑制CXCR4表达发挥抗TNBC作用,因此有可能成为TNBC患者的候选治疗剂。

 

Cobioer合作产品:  4T1-Luc   货号:CBP30102L

 

 

 

 

 

 

科佰生物

科佰生物示踪细胞具备优良的信号和严格QC,是活体成像实验的好帮手。

 

1. 优质母细胞,具备STR验证数据

 

 

2. 高信噪比

 

Figure 13. Detect Luciferase assay by Promega Bright-Glo Luciferase Assay System..The number of Luminescence signal is 552±24(Mean±SD) on KLN 205 cells while 636872±35212(Mean±SD) on KLN 205-Luc cells. 

 

3.体外高稳定性

 

Figure 14. Stablity test results. KLN 205-Luc cells showed at least 32 passage stability with similar luminescence unit.

 

扫二维码用手机看

联系我们

地址:南京市栖霞区纬地路9号/实验室地址:上海市浦东新区广丹路222号 

邮箱: sales@cobioer.com (销售部) tech@cobioer.com (技术部)

 COBIOER

扫一扫,关注我们公众号

Copyright ©2021 www.cobioer.com All Rights Reserved. 南京科佰生物科技有限公司版权所有 苏ICP备13038923号