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NFAT-Luc/Jurkat

CBP74025

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I. Background
      细胞内钙(Ca 2+)通过激活多种下游细胞介质来调节多种细胞功能。细胞内 Ca 2+水平 升高导致 Ca 2+ 和钙调蛋白依赖性磷酸酶钙调磷酸酶的激活。钙调磷酸酶可去磷酸化并激活 转录因子活化 T 细胞核因子 (NFAT) 家族,该家族在免疫功能、炎症反应、血管生成、 细胞增殖和分化中起关键作用。

      NFAT 家族由 NFAT1、NFAT2、NFAT3、NFAT4、NFAT5 五个成员组成,除 NFAT5 外, 该家族的所有其他成员都受细胞内 Ca 2+变化的调节。NFAT 蛋白具有一个保守的 N 末端结 构域,其中包含多个丝氨酸残基,这些残基在静息条件下被磷酸化。NFAT 蛋白的核转位 在 N 末端调节结构域磷酸化后受到抑制。当细胞受到刺激时,丝氨酸残基的去磷酸化是由 Ca 2+依赖性磷酸酶钙调磷酸酶介导的。去磷酸化暴露了核定位信号,并促进了核转位和 NFAT 调节基因的转录诱导。响应钙调磷酸酶 Ca 2+介导的激活,NFAT 蛋白可以自行诱导基 因表达,也可以与其他转录因子协同诱导基因表达。NFAT 蛋白与其他转录因子(如激活 蛋白 1(AP-1)结合并协同发挥作用,以诱导基因转录。由于与其他转录因子相互作用, NFAT 蛋白可以整合来自不同途径的信号并执行多种细胞功能。NFAT 蛋白在免疫细胞中的 重要功能之一是诱导炎性细胞因子表达。
 
II. Description

     NFAT-Luc Jurkat 报告基因药靶模型很好的模拟了体内 NFAT 的信号转导过程,原理见下图所示。

 


Figure 1. NFAT-Luc Jurkat 细胞模型原理图

 
III. Introduction
Host Cell: Jurkat
Expressed gene: NFAT-Luc
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+800 μg/ml Hygromycin B
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Peripheral blood
Disease: Acute T cell leukemia
Morphology: Lymphoblast
Growth Properties: Suspension
 
Ⅴ. Representative Data

Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001(we strongly suggest to purchase from Cobioer). Induction of NFAT activity by PMA with Ionomycin in NFAT-Luc Jurkat(C7C17).


Figure 3. Dose Response of CD3 Agonist Antibody in NFAT-Luc Jurkat(C7C17).


Figure 4. Dose Response of Tebentafusp (IMCgp100) in NFAT-Luc Jurkat(C7C17) with or without GP100(YLEPGPVTA) HLA0201 CHO.

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