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BRAF V600R/BaF3

CBP73385

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I. Background
      BRAF 基因是位于人类 7 号染色体长臂(7q34)的原癌基因,编码丝氨酸/苏氨酸蛋白 激酶,属于 RAF 激酶家族,参与 MAPK 信号通路调控细胞增殖、分化及存活。其最常见 的突变类型为 V600E 突变(约占 80%以上),该突变导致蛋白持续激活,引发细胞异常增 殖,与黑色素瘤(约 30-60%)、甲状腺乳头状癌(约 40-45%)、结直肠癌(约 10-15%) 等多种恶性肿瘤密切相关。

      BRAF 突变分为三类:I 类(如 V600E,单体激活)、II 类(二聚体激活)和 III 类 (失活突变),其中 I 类对 BRAF 抑制剂(如达拉非尼、维莫非尼)敏感,双靶治疗(达 拉非尼+曲美替尼)可显著延长患者生存期。BRAF 基因检测在肿瘤诊断、靶向治疗选择、 预后评估及耐药监测中具有重要临床价值,是精准医疗的关键靶点之一。.
 
II. Description
      BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。



Figure 1. 
BRAF[V600R] BaF3 细胞的构建原理图
 
III. Introduction
Cell Line Name: BRAF V600R/BaF3
Host Cell: Ba/F3
Stability: 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Anti-proliferation assay and PD assay
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml Puromycin
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1. WB of BRAF V600R/BaF3


Figure 2. WB of BRAF V600R/BaF3

2.Sanger of BRAF V600R/BaF3

Figure 3. Sanger of BRAF V600R/BaF3

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of BRAF [V600R] BaF3 (C14).

 

 

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