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GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell

CBP71592

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I. Background
      胰淀素(Amylin)受体的三种类型的已被确定,即 AMY1,AMY2 和 AMY3。胰淀素 受体属于 B 类 GPCR,是异二聚体复合物,由降钙素受体(CTR)与受体活性修饰蛋白 (RAMPs)结合形成。该受体的 CTR 组分具有相同的 GPCR 结构:7 个跨膜相互连接的α- 螺旋,将细胞外信号传递到细胞内细胞质信号级联。RAMP 有三种类型(RAMP1、 RAMP2 和 RAMP3),它们共享 31%的氨基酸序列,具有相似的基本结构。RAMP 是将 CTR 转运到细胞膜并调节其配体特异性的重要肽,它可以改变特定 GPCR 的药理学、功能 和细胞运输。

      GLP-1R 的内源性配体是 GLP-1(7-36)和 GLP-1(7-37),它们是胰高血糖素原翻译 后加工的产物。GLP-1R 主要通过 Gαs/cAMP 通路发出信号,直接导致葡萄糖诱导的胰岛 素颗粒分泌;但有证据表明 GLP-1R 可与 Gαq 和其他 G 蛋白偶联;GLP -1R 激活后,C 末 端发生磷酸化,进一步募集β-抑制蛋白,导致受体内化和脱敏。

      GLP1R 与 AMY3 的联合作用是当前代谢性疾病研究的前沿方向。结合 GLP-1 受体激 动剂和胰淀素受体激动剂被认为具有协同减肥和降糖效果。
 
II. Description
      GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell 报告基因药靶模型很好的模拟了体内GLP1R&CTR/RAMP3 的信号转导过程,原理见下图所示。
 


Figure 1. GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell 细胞模型原理图

III. Introduction
Expressed gene:

GLP1R、CTR、RAMP3

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: DMEM + 10%FBS + 2 μg/ml Puromycin+200 μg/ml Hygromycin B+5 μg/ml Blasticidin+400 μg/m1 G418
Mycoplasma Status: Negative
Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s): Functional assay for GLP1R&CTR/RAMP3
Transducer: Gs
 
IV. Representative Data


Figure 2. WB of GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell.



Figure 3.  Recombinant GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell stably expressing CTR&GLP1R.


Figure 4. Dose Response of Agonists in GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell(C49).


Figure 5. HTRF cAMP Assay with GLP1R&CTR/RAMP3 Dual Reporter Cell(C49).



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