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TPOR(Ligand Dependent)/BaF3

CBP73266

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I. Background

      血小板生成素(TPO)是巨核细胞生成的主要细胞因子调节因子,通过其特异性细胞 表面受体 MPL 起作用。缺乏 TPO 或 MPL 的小鼠在稳态下产生约 10% 的正常巨核细胞和 血小板,并且在骨髓(BM)移植或细胞毒性药物等应激下血小板的恢复减弱。MPL 信号 转导在维持正常的造血干细胞(HSC)数量和活动方面也起着重要作用。除了刺激巨核生 成外,TPO 还可以单独或与其他细胞因子(包括 GM-CSF、IL3、IL6、IL11、SCF、FLT 配 体、FGF 和 EPO)联合支持造血干细胞和 MK 祖细胞的存活和扩增。

      TPO 与其特异性受体 Mpl(TPOR)蛋白结合,触发 Jak2 的激活和受体的磷酸化, Tpo/Mpl 激活的主要信号级联反应包括 JAK/STAT、PI3K-Akt 和 Ras-MAPK1/3 通路。 

 
II. Description

      TPOR(Ligand Dependent) BaF3 药靶细胞,通过转导野生状态的 TPOR 基 因到 BaF3 细胞系中,稳定表达人野生形态下的 TPOR 基因。 BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。 
 



Figure 1. TPOR(Ligand Dependent) BaF3 细胞模型原理图

 
III. Introduction

Cell Line Name:

TPOR(Ligand Dependent)/BaF3

Host Cell:

BaF3

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+2 μg/ml Puromycin+500 nM Eltrombopag

Mycoplasma Status:

Negative

 
IV. Representative Data

1. WB of TPOR(Ligand Dependent)/BaF3


Figure 2. WB of TPOR(Ligand Dependent)/BaF3.
 

2.Anti-proliferation assay

Figure 3. CTG Proliferation Assay of TPOR(Ligand Dependent) BaF3(C3).


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