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VPAC1 β-Arrestin CHO

CBP71597

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I. Background
      PACAP/VIP 受体家族属于 B 类 G 蛋白偶联受体(GPCR),包含 PAC1R (PAC1)、 VPAC1R (VPAC1) 和 VPAC2R (VPAC2) 三个亚型,共同响应神经肽 PACAP(垂体腺苷酸环化酶激活肽)和 VIP(血管活性肠肽)的调控,通过激活 Gs/cAMP-PKA 核心信号轴 (部分亚型偶联 Gq/PLC)广泛协调神经内分泌、代谢稳态与免疫调节。

      VPAC1 受体(血管活性肠肽受体 1 型) 作为 B 类 GPCR 家族的核心成员,主要在免疫细胞、胃肠道及呼吸道高表达,以内源性配体血管活性肠肽(VIP) 和垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP) 为高亲和力激活源,通过专一性偶联 Gs/cAMP-PKA 信号轴发挥关键 生理调控作用。VPAC1 的激活可抑制巨噬细胞炎症因子释放(如 TNF-α、IL-12)、促进肠 道平滑肌舒张与上皮屏障修复、扩张支气管并抑制黏液分泌,从而维持免疫耐受、胃肠动力及呼吸稳态。VPAC1 功能缺陷已被证实与炎症性肠病(IBD)、哮喘和类风湿关节炎的病理进程密切相关,而靶向激动剂在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)与 IBD 治疗中已展现 显著疗效,凸显其作为免疫-黏膜稳态核心调节器的治疗价值。
 
II. Description
      VPAC1 β-Arrestin CHO 报告基因药靶模型很好的模拟了体内 VPAC1/β-Arrestin 的信号转导过程,原理见下图所示。当缺乏配体刺激时,β-Arrestin 不与 VPAC1 结合,融合β- Arrestin 的荧光素酶处于失活构象,当 VPAC1 遭遇配体刺激时,融合荧光素酶报告基因的 β-Arrestin 被招募,使荧光素酶报告基因处于激活状态,加入其底物后发光信号增强。



Figure 1. 
VPAC1 β-Arrestin CHO 细胞模型原理图
 
III. Introduction
Expressed gene:

VPAC1

Host Cell:

CHO

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS +5 μg/ml Puromycin +5 μg/ml Blasticidin
Mycoplasma Status: Negative
Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s):

Functional assay for VPAC1 Receptor

Assay Format: β-Arrestin
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Hamster
Tissue: Ovary
Morphology: Epithelial
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Recombinant VPAC1 β-Arrestin CHO stably expressing VPAC1.


Figure 3. Dose Response of Agonists in VPAC1 β-Arrestin CHO(C53).


Figure 4. Inhibition of PACAP 1-38 induced β-Arrestin Recruitment by PACAP38 Neutralization Ab in VPAC1 β-Arrestin CHO(C53).

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