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c-Kit D816V/BaF3

CBP73206

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I. Background

      c-Kit 基因位于人类染色体 4q12-13 区域,属于原癌基因,编码Ⅲ型酪氨酸激酶受体 CD117,其配体为干细胞因子(SCF)。该基因通过激活 PI3K、MAPK、JAK-STAT 等信 号通路,调控细胞增殖、分化、存活及凋亡,在造血干细胞、黑色素细胞、生殖细胞等发 育中起关键作用,并参与胚胎发育、配子形成及免疫细胞功能。

      c-Kit 异常激活与多种肿瘤相关,如 80%的胃肠道间质瘤(GIST)存在 c-Kit 突变,常 见于 11 号外显子(如 K642E 突变),导致受体持续活化,促进肿瘤生长;此外,急性髓 系白血病、黑色素瘤、肥大细胞增生症等也可见其突变。靶向药物如伊马替尼可抑制异常 c-Kit 活性,改善患者预后,尤其在 GIST 中疗效显著。

      在正常生理中,c-Kit 还参与维持组织干细胞功能及生育能力。其功能缺失突变则可能 引发斑驳症等遗传性疾病。当前,c-Kit 仍是癌症靶向治疗的重要靶点,相关药物研发持续 推进,以优化疗效并克服耐药性。

 
II. Description

      BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。
 



Figure 1. 
c-Kit[D816V] BaF3 细胞的构建原理图

 
III. Introduction
Cell Line Name: c-Kit D816V/BaF3
Host Cell: Ba/F3
Stability: 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Anti-proliferation assay and PD assay
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1.WB of  c-Kit D816V/BaF3


Figure 2. WB of 
c-Kit D816V/BaF3


2. Sanger of c-Kit D816V/BaF3



Figure 3. Sanger of c-Kit D816V/BaF3


3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of  c-Kit [D816V] BaF3 (C1).

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