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TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell

CBP74539

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I. Background
      TNFR2(肿瘤坏死因子受体2,TNFRSF1B 或者CD120b)是肿瘤坏死因子受体超家族的重要成员,主要与配体TNF-α结合发挥作用。与几乎在所有细胞上均有表达的TNFR1 不同,TNFR2 的表达具有高度的细胞特异性,其主要高表达于调节性T 细胞(Tregs)、髓源性抑制细胞(MDSCs)等免疫抑制细胞表面,同时在部分肿瘤细胞、活化的效应T 细胞及内皮细胞上也可被诱导表达。TNFR2 胞内段缺乏“死亡结构域”,因此不直接介导细胞 凋亡,而是成为免疫系统中的调节中枢。在疾病方面,TNFR2 扮演着对立统一的角色:一方面,其信号缺陷与类风湿关节炎、炎症性肠病等自身免疫病相关;另一方面,在多种癌症(如肺癌、乳腺癌、食管癌)中,TNFR2 的高表达常提示不良预后,它可帮助肿瘤构建免疫抑制微环境、促进肿瘤生长和免疫逃逸。

      TNFR2 主要通过募集TRAF2 等衔接蛋白,激活下游多条信号通路来发挥功能。其核心机制包括:激活NF-κB 通路(包括经典和非经典途径),促进细胞存活、增殖及炎症相关基因的表达;激活PI3K-Akt 通路,保护细胞免受凋亡,维持细胞生长;激活MAPK 通 路,参与调节细胞增殖和分化。TNFR2 信号可显著促进Tregs 的激活、扩增及其免疫抑制功能,同时也能激活MDSCs,从而维持免疫耐受和组织稳态。在肿瘤微环境中,TNFR2 一方面直接通过上述存活通路促进肿瘤细胞自身增殖和抵抗凋亡,另一方面通过扩增Tregs 和MDSCs建立免疫抑制屏障,抑制效应T 细胞的抗肿瘤反应。
 
II. Description
       TNFR2(TNFR1 KO)Effector Reporter Cell 报告基因药靶模型很好的模拟了体内TNFR2 的信号转导过程,原理见下图所示。



Figure 1. TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell 细胞模型原理图
 
III. Introduction
Expressed gene: TNFR2
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+800 μg/ml Hygromycin B+1 μg/ml Puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Representative Data


Figure 2. Sanger of TNFR2(TNFR1 KO)  Effector Reporter Cell.

Figure 3. Recombinant TNFR2(TNFR1 KO)  Effector Reporter Cell stably expressing TNFR2.


Figure 4. Dose Response of TNFR2 Agonist Ab in TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell(C64).


Figure 5. Dose Response of TNFR2 Agonist Ab in TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell(C64).


Figure 6. Blocking of TNFα induced TNFR2( TNFR1 KO) Effector Reporter Cell(C64) Activity by TNFα Neutralization Abs with Membrane Anchored TNFα Cell(Adherent, C12).


Figure 7. Blocking of TNFα induced TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell( C64) Activity by TNFR2 Blocking Ab with Membrane Anchored TNFα Cell ( Adherent, C12).

 

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